Contenido solutions n° 2/2009 > Informaciones complementarias

Microscopía STED: consagración con un donut

Fuente : Leica Microsystems
La microscopía STED (Stimulated Emission Depletion) se basa en los principios fundamentales de la tecnología láser y la microscopía de fluorescencia. Aquí la clave para incrementar la resolución óptica es reducir el foco (fluorescente). En la microscopía de fluorescencia un rayo láser enfocado excita moléculas de un pigmento contenidas en una muestra de ensayo, de forma que emitan luz. La luminiscencia residual de la sustancia pigmentante se utiliza para mejorar la resolución. En la tecnología STED un 2º rayo láser incide sobre la muestra justo después de haber sido ésta excitada por el primero. Esto permite que las moléculas de pigmento excitadas reposen nuevamente antes de la emisión de la luz fluorescente. El segundo rayo se posiciona en torno al primero, formando un anillo – como un dónut – para asegurar que sólo brillarán unas pocas moléculas en el centro del punto del láser.

Este método permite que las estructuras situadas en el foco sean visualizadas con una nitidez mucho mayor, de forma más estructurada e incluso con efecto espacial. En disposiciones de laboratorio se han podido alcanzar resoluciones de incluso 10 nm. “Los límites de STED todavía no se han alcanzado,” asegura el Prof. Stefan Hell. El Director del Instituto Max Planck de Química Biofísica, en Gotinga (Alemania), ha recibido numerosos premios por su desarrollo, que permite observar estructuras moleculares y así hacer realidad el sueño de los biólogos celulares. <|